WWW.LI.I-DOCX.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Различные ресурсы
 


«TM E-4300 Клеточный раковый антиген CA 125 Набор реагентов для ИФА для количественного определения CA 125 в сыворотке и плазме ...»

TM E-4300 Клеточный раковый антиген CA 125

Набор реагентов для ИФА для количественного определения CA 125 в сыворотке и плазме человека.

Только для in-vitro диагностики.

Компоненты набора

Микропланшет:

96-луночный (12Х8), стриповый, разборный микролуночный планшет, покрытый мышиными моноклональными анти- CA 125 антителами.

Нулевой стандарт: 1 флакон, 3 мл, готов к использованию.

содержит 0,010% methylisothiazolone, 0,015% bromonitrodioxane в качестве консерванта.

Стандарты (1-5), пять флаконов, 0,5 мл, готовы к использованию.

Содержат: 15, 30, 80, 200, 500 ед. / мл.

содержит 0,010% methylisothiazolone, 0,015% bromonitrodioxane в качестве консерванта.

Контроль: 1 флакон (лиофилизилованный), 0,5 мл, готов к использованию.

Значения и диапазон указаны на этикетке.

Содержит 0,3% проклин в качестве консерванта.

Концентрированный ферментный конъюгат х10, 1 флакон, 0,75 мл.

анти- CA 125 антитела (мышиные моноклональные) конъюгированные с пероксидазой хрена.

Содержит 0,010% methylisothiazolone, 0,010% bromonitrodioxane в качестве консерванта.

Раствор для разведения конъгата, 1 флакон, 7 мл,

содержит 0,3% проклин в качестве консерванта.

Раствор ТМБ-субстрата, 1 флакон, 14 мл, готов к использованию.

Стоп-раствор, 1 флакон, 14 мл, готов к использованию

содержит серную кислоту.

Концентрированный промывочный раствор х40, 1 флакон, 30 мл.

Оборудование и материалы, необходимые, но не поставляемые:

- микропланшетный ридер 450±10 нм- откалиброванные прецизионные микропипетки с наконечниками

- абсорбирующая бумага

- дистиллированная вода

Хранение и стабильность набора

Храните реагенты при 2-8 С. Закрытые реагенты сохраняют свою активность в течение всего срока годности.

Открытые реагенты храните при температуре 2-8 С. Микролуночный планшет храните в закрытом фольгированном пакете.

Подготовка к анализу.

Перед использованием все реагенты должны достичь комнатной температуры.

Контроль.

Разведите контроль 0,5 мл дистиллированной воды и дайте постоять 10 минут.

Аккуратно перемешайте контроль непосредственно перед использованием.

Примечание: приготовленный контроль необходимо хранить замороженным при температуре -20С.

Промывочный раствор.

Разведите 30 мл концентрированного промывочного раствора с 1170 мл деионизированной воды до конечного объёма 1200 мл.

Приготовленный промывочный раствор стабилен в течении 2 недель при комнатной температуре.

Ферментный конъюгатРазведите концентрированный ферментный конъюгат в соотношении 1:10 раствором для разведения конъюгата.

Стабильность приготовленного раствора конъюгата: 1 неделя при 2-8С в закрытом контейнере.

Например: разведите 700 мкл концентрированного конъюгата с 6,3 мл раствора для разведения конъгата. Если будет использоваться весь планшет, то разведите 600 мкл концентрированного конъюгата с 5,4 мл раствора для разведения конъюгата до общего объёма 6 мл.

Количество стриповКонцентрированный конъюгат х10 (мкл) Раствор для разведения конъюгата (мл)

1 50 0,45

2 100 0,9

3 150 1,35

4 200 1,8

5 250 2,25

6 300 2,7

7 350 3,15

8 400 3,6

9 450 4,05

10 500 4,5

11 550 4,95

12 600 5,4





Образцы:

Плазма или сыворотка (гепарин- или EDTA-плазма).

Не используйте гемолитические, желтушные или липэмические образцы.

Внимание: не используйте образцы содержащие азид натрия.

Разведение образцов:

Если в результате исследования образцы содержат более высокие концентрации, чем стандарты, то их можно развести с нулевым стандартом в соотношении 1:10 или 1:100 и повторить процедуру анализа. При расчете результатов нужно будет учитывать коэффициент разведения.

Процедура анализа

Общая информация:

- перед применение все реагенты и образцы должны достичь комнатной температуры. Все реагенты необходимо аккуратно перемешать (без образования пены).

- после начала процедуры анализа все этапы должны быть завершены без перерыва.

- используйте новые одноразовые наконечники пипеток для стандартов, контроля и образца.

- Абсорбция является функцией от времени инкубации и температуры. Перед началом анализа, рекомендуется подготовить все реагенты: снять крышки, все необходимые стрипы закрепить в держателе и т.д. Это позволит обеспечить равные промежутки времени на каждом этапе без перерыва.

- Как правило, ферментная реакция носит линейный характер и пропорциональна от времени и температуры.

Анализ:

Закрепите необходимое количество стрипов в держателе.

Добавьте по 50 мкл стандартов, контроля и образцов сыворотки в соответствующие лунки.

Добавьте 50 мкл подготовленного раствора ферментного конъюгата в каждую лунку.

Тщательно перемешайте в течение 10 секунд. Очень важно достичь полного смешивания на этом этапе

Инкубируйте 30 минут при комнатной температуре без покрытия пластины.

Резко вытряхните содержимое лунок

Промойте лунки 3 раза разведенным промывочным раствором (400 мкл на лунку). Быстро переверните ячейки на абсорбирующую бумагу, чтобы удалить оставшиеся капли.

Важно:

Чувствительность и точность данного анализа зависит от правильного выполнения процедуры промывания!

Добавьте 100 мкл раствора ТМБ-субстрата в каждую лунку.

Инкубируйте 30 минут при комнатной температуре.

Для остановки ферментной реакции добавьте 100 мкл Стоп-раствора в каждую лунку.

Считайте ОП при 450±10 нм на микропланшетном ридере в течение 10 минут после добавления Стоп-раствора.

Расчет результатов.

Рассчитайте средние значения абсорбции для каждого набора стандартов, контролей и образцов

Постройте стандартную кривую со значением абсорбции на вертикальной (Y) оси и концентрацией стандарта на горизонтальной (Х) оси, указав на ней средние величины абсорбции, полученные от каждого стандарта.

Используя стандартную кривую и средние значения абсорбции образца, определите соответствующую концентрацию образца (если позволяет оборудование: используйте автоматический метод расчета результата на 4 параметра)

Концентрации образцов можно считывать непосредственно со стандартной кривой. Если концентрация образца выше, чем верхний предел обнаружения, то он должен быть разбавлен нулевым стандартом. При этом для расчета концентрации должен быть принят во внимание коэффициент разведения.

Ниже приведен типичный пример стандартной кривой СА 125 ИФА

Стандарт Оптическая плотность при 450 нмНулевой стандарт (0 ед./мл) 0.06

Стандарт 1 (15 ед / мл) 0.12

Стандарт 2 (30 ед / мл) 0.20

Стандарт 3 (80 ед / мл) 0.38

Стандарт 4 (200 ЕД / мл) 0.88

Стандарт 5 (500 ЕД / мл) 2.00

ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ:

Настоятельно рекомендуется, чтобы каждая лаборатория определила свои границы нормальных и аномальных значений.

___________________________________5 – 95%_____

Здоровые (мужчины и женщины) < 29,6 Ед / мл

Это соответствует значению cut off, указанному в литературе 35 ед / мл.

Определяемый диапазон: 0 - 500 Ед / мл.

Чувствительность: 3,327 ед / мл




Похожие работы:

«РЕШЕНИЕ Именем Российской Федерации 26 апреля 2017 г. г. Химки, Московская областьХимкинский городской суд Московской области в составе: председательствующего судьи В. А. Кобызева, при секре...»

«Тема урока: Обособленные члены предложения. Разбор заданий. Подготовка к ЕГЭ.Цели урока: Образовательные:   1) повторение и обобщение знаний учащихся об обособленных членах предложения (определения и обстоятельства);2) отработка умения определять строение предложений с обособлен...»

«Практическое занятие №2 Расчет на износ цилиндрических зубчатых передач. Анализ кинематики зубчатого зацепления. Основными кинематическими характеристиками зубчатых передач, влияющими на процесс изнашивания, являются их скорости качения и скольжения. Из теори...»

«ТЕСТ 1. ОСНОВНЫЕ СВЕДЕНИЯ О СТРОЕНИИ АТОМАА1.Открыл катодные лучи, доказав, что в состав атома входит неизвестная ранее частица — электрон:1) Резерфорд 2) Бор3) Томсон 4) Рентген А2. Предложил планетарную модель атома1) Бор 2) Беккерель3) Резерфорд 4) Кюри A3. Атом состоит из1) протонов и электронов 2) ядра и электронов 3) протонов и нейтрон...»

«Ханты-Мансийский автономный округ Югра (Тюменская область) Территориальная избирательная комиссия города КогалымаПОСТАНОВЛЕНИЕ от 24 апреля 2013 года№ 41/227 О формировании участковых избирательных комиссийЗаслушав информацию предс...»

«-228600-114300 ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "ПРЕСТИЖ-АГРО" 220112, РБ, г. Минск, ул. Шпилевского, д. 57–7Н Тел.: (8-017) 220-00-72, 220-00-83, 220-08-56,, (8-029) 7-77-32-28, (8-029) 1-83-81-75, (8-029) 6-20-56-20, Эл. адрес: prestizh-agro@t...»

«Глава 16 Взяли англичане левшу на свои руки, а русского курьера назад в Россию отправили. Курьер хотя и чин имел и на разные языки был учен, но они им не интересовались, а левшою интересовались, — и пошли они левшу водить и все ему показывать. Он смотрел все их производство: и металлические...»







 
2017 www.li.i-docx.ru - «Бесплатная электронная библиотека - различные ресурсы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.